キトロロギストXの記録
激しく変化する昨今のもとで一生をカンキツ研究に捧げてきた老学者の独白を広く一般のカンキツ愛好家(キトロロマニア)に聞いていただきたくブログを開設しました。お閑な時にどうぞ目を通してください。
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ネーブルオレンジ果肉のベシクルの生体染色
nebusome果実脇李

 ネーブルオレンジは、甘い果実としては、極めて多くのベシクルを持つ品種です。さきに述べましたように、ベシクルの生体染色によって、浸透圧ストレスへの反応が、細胞レベルで生きた状態で、観察、検討できるようになりました。そこで、ネーブルオレンジについて、ニュートラルレッド(NR)着色の蔗糖液への反応を、観察しました。

nebusome新染め分け
nebusome-新糖度
nebusome新重さ

1)ベシクルの反応
 砂糖を0%、10%、20%、30%含むNR液に、果肉の長柄ベシクル各50個を浸漬しました。24時間後には、ほとんどのベシクルが赤く染まりました。しかし、どの区でも淡着色ベシクルが含まれていましたので、濃着色ベシクルと分けて、ベシクルの重さと糖度を比較測定しました。その結果、両者に大きな糖の変化率の違いがみられました。。
 着色したベシクルの内部を解剖しましたところ、中央部の容積の大きなベシクル細胞は、染色されていませんでした。

nebusome新細胞染色

2)ベシクル細胞の反応
 そこで、ベシクル中央部だけを摘出して、上のようなシリーズのNR液に組織染色しましたところ、1時間以内に、ベシクル細胞が速やかに染色されました。細胞壁は赤色に、細胞質は黄色にNR染剤で染め分けられ、外液に対する細胞質の反応が、観察できるようになりました。
 その結果分かったことは、①:ベシクル細胞の原形質分離は、糖の薄い低張外液ではみられず、濃糖外液の高張液域でみられたこと。②:原形質分離のみられたベシクル細胞には、細胞壁が薄くなったり、細胞壁が溶解している細胞がみられる場合のあることが、明らかになりました。

nebusome各部
nebusome新周辺中央糖度さ

3)その他のベシクル細胞の反応
 しかし、これらの変化は、細胞容積の小さい先端部や、外周部の細胞では、知ることができませんでした。因みに、細胞の小さいベシクル周辺部の糖度と、細胞の極めて大きい中央部の糖度を比較しましたところ、外周部がやや高いという結果になりました。

 一般に、浸透圧の近似値は、溶液の重量モル濃度と気体定数と絶対温度の積であらわされます。蔗糖液については、浸透圧計で測定した浸透圧値が示されていました。5%液が3.3気圧、10%が6.6気圧などとなり、高張液域の15%が10気圧、30%が20気圧程度になります。これらの気圧値は、例えば台所の圧力釜が2から2.5気圧ありますので、如何に大きいものか分かりました。ベシクルの中央部だけを取り出して、フリーになったベシクル細胞が、その高い気圧の浸透圧で、細胞壁のこわれる様を、動画として撮ってみたいものです。
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